ELISA試劑盒大家在實(shí)驗(yàn)中多多少少會(huì)有些問(wèn)題出現(xiàn),復(fù)孔的稀釋步驟也不例外。那么ELISA檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中復(fù)孔的稀釋到底有多關(guān)鍵呢?近日,有位客戶來(lái)電表明了自己的實(shí)驗(yàn)疑惑:“設(shè)計(jì)ELISA復(fù)孔檢查時(shí),是對(duì)同一個(gè)樣品作兩次稀釋,再分別加到板上的兩個(gè)孔,還是只稀釋一次,然后吸取兩次分別加到兩個(gè)孔?前者似乎把稀釋時(shí)的誤差也考慮到了,但做出來(lái)的結(jié)果兩個(gè)孔相關(guān)挺大的。而較常使用的是哪種稀釋方法?”
為了減小誤差,是先稀釋再加樣。而針對(duì)這位客戶所遇到的疑問(wèn),上海基免生物科技有限公司技術(shù)人員是這樣解說(shuō)的:
1. 前者測(cè)的是稀釋和移液的誤差,后者只有移液誤差。
2. 一般都是稀釋一次,分兩孔吧。同濃度的分復(fù)孔。
3. 由于是從同一原液稀釋,一般不考慮稀釋誤差(稀釋誤差是存在的),都是稀釋到想要的倍數(shù)直接分孔(而不是一一稀釋,這樣可以使稀釋誤差減小)。
4. 復(fù)孔是為了排除移液體積,板的影響,以及其他系統(tǒng)誤差的,要求復(fù)孔的濃度是一致的。稀釋后分孔能滿足此要求,一一稀釋不能。
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