抗體關(guān)于特異性的挑選:特異性的挑選首要需求考慮四個(gè)方面:蛋白特異性、種屬特異性、試驗(yàn)辦法特異性、符號(hào)物的特異性。
1、蛋白特異性:針對(duì)需求檢測(cè)的蛋白查找抗體,幾個(gè)細(xì)節(jié)要差異,重組表達(dá)的蛋白和內(nèi)源性蛋白的檢測(cè),對(duì)抗體的要求是不相同的,留心查看抗體說明書的檢測(cè)說明。假定重組蛋白不是全長(zhǎng)表達(dá),則需求留心抗體的免疫原區(qū)域是否在重組蛋白區(qū)域內(nèi)。
2、種屬特異性:同種蛋白不同物種,有著或大或小的差異?,F(xiàn)在大部分商品化抗體都是以人源蛋白序列為模板重組蛋白或規(guī)劃多肽抗原的,依據(jù)蛋白的同源性的情況與其他種屬發(fā)作穿插反應(yīng)。需求參照說明書注明的可反應(yīng)種屬信息。一些稀有種屬很難找到抗體,可以經(jīng)過蛋白的序列比對(duì),挑選同源序列免疫的抗體。
3、試驗(yàn)辦法特異性:現(xiàn)在運(yùn)用抗體的試驗(yàn)辦法有許多,不同的運(yùn)用辦法過程中,由于對(duì)蛋白樣品的處理辦法不相同,蛋白的含量有差異,對(duì)抗體的辨認(rèn)表位和效價(jià)要求都是不相同的。詳細(xì)的依據(jù)說明書注明的產(chǎn)品應(yīng)用辦法進(jìn)行挑選。
4、符號(hào)物的特異性一般依據(jù)試驗(yàn)操作的試驗(yàn)辦法不會(huì)運(yùn)用帶有符號(hào)的一抗,比方WB、IHC等,都是經(jīng)過二抗類的試劑符號(hào)抵達(dá)作用呈現(xiàn)的目的。但是依據(jù)儀器分析的一些試驗(yàn),或許就會(huì)運(yùn)用到直接符號(hào)的一抗,比方流式試驗(yàn)。那么需求了解到自己行將運(yùn)用的儀器能檢測(cè)到的熒光規(guī)模,不通的參數(shù)要求挑選對(duì)應(yīng)的符號(hào)物。在免疫熒光雙標(biāo)試驗(yàn)中,需求選配不同的熒光物。
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