ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟繁瑣,操作者們所犯的問題也各有不同。近日,南京大學(xué)周老師到我司何咨詢問道:為什么ELISA標(biāo)準(zhǔn)品會出現(xiàn)“溢值"的現(xiàn)象呢?看到問題后,何立即轉(zhuǎn)到技術(shù)部,隨后公司技術(shù)部給周老師去,
解析造成ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品溢值的原因:
① 樣品/標(biāo)準(zhǔn)品不正確稀釋。
② 孵育時(shí)間/溫度不正確。
③ 在孵育時(shí)為蓋上酶聯(lián)板覆蓋物:在孵育時(shí)需蓋上酶聯(lián)板覆蓋物,以防止液體蒸發(fā)或孵育期間的污染。每個(gè)試劑盒內(nèi)均有足夠數(shù)量的酶聯(lián)板覆蓋物。
④ 檢測波長不正確:要保證分光光度劑的檢測波長是正確的。
⑤ TMB底物的顯色時(shí)間過長:請監(jiān)控顯色時(shí)間。說明書中所示的顯色時(shí)間可能因?yàn)闇囟群推渌鼨z測條件的不同而稍有變化。
⑥ 樣品不適合此檢測:在說明書中會列出每種產(chǎn)品的適用標(biāo)本范圍,超出范圍的標(biāo)本可能不適于此試劑盒或者檢測條件需要摸索。
⑦ 樣品/標(biāo)準(zhǔn)品污染:樣品或標(biāo)準(zhǔn)品的污染可能會導(dǎo)致檢測結(jié)果“溢值"。
⑧ 偶合試劑不正確稀釋:要嚴(yán)格按照說明書來稀釋偶合試劑,濃度過高會造成OD的“溢值"HRP偶合試劑的不正確稀釋
⑨ 所用稀釋液不對:只能使用相應(yīng)試劑盒內(nèi)的稀釋液稀釋樣品和標(biāo)準(zhǔn)品。
ELISA試劑盒找到問題原因后,解決問題就容易的多了。各位朋友們也是一樣,在檢測的時(shí)候一定要認(rèn)真仔細(xì),并嚴(yán)格按照要求來操作。實(shí)驗(yàn)前,對ELISA試劑盒說明書仔細(xì)的閱讀。更多實(shí)驗(yàn)問題可我司技術(shù)人員,祝大家實(shí)驗(yàn)成功!
?
上海晶抗生物工程有限公司
地址:上海市金山工業(yè)區(qū)亭衛(wèi)公路6558號9幢2441室
版權(quán)所有:上海晶抗生物工程有限公司 備案號:滬ICP備16026504號-5 總訪問量:532201 站點(diǎn)地圖 技術(shù)支持:智慧城市網(wǎng) 管理登陸