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PUC18質(zhì)粒

更新時(shí)間:2022-04-25

簡(jiǎn)要描述:

PUC18質(zhì)粒由晶抗生物提供,包括PUC18質(zhì)粒說(shuō)明書,以及PUC18質(zhì)粒用途 ,性狀等詳細(xì)介紹。

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PUC18質(zhì)粒 


其他中文名稱 : PUC18


級(jí) 別 : BR


保 存 : -20℃


濃 度 : 450ug/ml


性 狀 : 液體或粉末。pUC18是適合于雙脫氧法DNA測(cè)序的載體,通常運(yùn)用于重組dna的分子克隆中,首先我們制備大腸桿菌的感受態(tài)細(xì)胞(能接受外來(lái)重組的dna),這種感受態(tài)菌株必須不同外來(lái)DNA分子發(fā)生遺傳重組,通常是rec基因缺陷型的突變體,同時(shí)它們必須是限制系統(tǒng)缺陷或限制與修飾系統(tǒng)均缺陷的菌株,即具有具有這三種缺陷(rk mk rec ),同時(shí)對(duì)氨芐青-霉素敏感(ap)。puc18載體自身帶有抗氨芐青-霉素基因,而外源片段不具有,這樣只有帶有puc18的轉(zhuǎn)化子的菌株才能在氨芐青-霉素平板上存活,而外源片段自身環(huán)化的不能存活,這稱為抗性篩選。pUC18 上帶有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的調(diào)控序列和β-半乳糖苷酶N 端146 個(gè)氨基酸的編碼序列,在這個(gè)編碼區(qū)中插有一個(gè)多克隆位點(diǎn),且不影響正常功能,DH5α感受態(tài)菌株帶有β-半乳糖苷酶C 端部分序列的編碼信息,當(dāng)puc18載體在正常情況下同感受態(tài)菌株融合后,互補(bǔ)表達(dá)具有酶活性的蛋白質(zhì),稱為α-互補(bǔ)現(xiàn)象,當(dāng)有外源片段插入多克隆位點(diǎn)后,互補(bǔ)現(xiàn)象消失,其形成的菌株顏色具有很大的差異,很容易鑒別,這種篩選方法稱為α-互補(bǔ)現(xiàn)象篩選。由上可見,puc18載體除了能重組導(dǎo)入外源片段外,在篩選表達(dá)過程中還具有重要的作用


用 途 : 生化研究??寺⊥庠椿颉@胠ac promoter進(jìn)行基因表達(dá)。使用M13 primers進(jìn)行DNA測(cè)序。


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